التنميط المناعي للأرومات الدموية

ارتبط التقدم الملحوظ في أبحاث أمراض الدم في السنوات الأخيرة باستخدام الأساليب المناعية الحديثة والوسائل الآلية لتحليل وفرز خلايا الدم المحيطي ونخاع العظم - أجهزة قياس التدفق الخلوي. في كثير من الحالات، وخاصةً في أمراض التكاثر اللمفي، لا تسمح لنا الدراسات المورفولوجية والكيميائية الخلوية التقليدية لخلايا ركيزة المرض (الدم، ونخاع العظم الأحمر، والعقد اللمفاوية، والطحال، إلخ) بتحديد التنوع الكامل للمتغيرات بين الأشكال المتشابهة شكليًا وتحديد مصدر الاستنساخ المرضي. لا يمكن حل هذه المشكلات إلا من خلال دراسة الخصائص المناعية للخلايا. تتوافق كل مرحلة من مراحل تمايز الخلايا المكونة للدم مع مجموعتها الخاصة من المستضدات، والتي تُسمى وفقًا للتصنيف الدولي "التمايز"، وتنقسم إلى مجموعات تمايز، يُشار إليها بالاختصار CD.

في التغيرات الورمية، قد يحدث تثبيط للتمايز في أي مرحلة من مراحل نمو الخلايا الطبيعية، مما يؤدي إلى تكوين استنساخ من الخلايا المرضية التي تُحدد ركيزة المرض، ولها نفس الخصائص المناعية (أو النمطية). بإجراء دراسات على هذه العلامات على الخلايا، يُمكن تحديد شكل المرض ومتغيراته التي تُطابقها، أي بناءً على النمط الظاهري المناعي للخلايا، يُمكن إجراء تشخيص تفريقي، وهو أمرٌ بالغ الصعوبة في أمراض التكاثر اللمفي، لأن الخلية الرئيسية للركيزة المرضية للمرض هي خلايا متطابقة شكليًا تقريبًا.

يتيح التنميط الظاهري استخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة لتحديد نوع خلايا الدم الأرومية والناضجة من سلسلة الخلايا النقوية، والخلايا اللمفاوية الأحادية، وذلك من خلال وجود مستضدات التمايز (المستقبلات) في جدار الخلية. يصف قسم "تقييم الحالة المناعية للجسم" جزئيًا خصائص دراسة العلامات الخلوية وأهميتها التشخيصية؛ ويرد أدناه وصف موجز لعلامات المستضدات الخلوية وعلاقتها بتشخيص داء الأرومة الدموية. يمكن الكشف عن المستضدات (العلامات) التالية على أغشية خلايا الدم ونخاع العظم الأحمر.

• CD2 هو جليكوبروتين غشائي أحادي. يوجد على سطح جميع الخلايا اللمفاوية التائية المنتشرة في الدم، وعلى بعض الخلايا اللمفاوية القاتلة الطبيعية. يشارك CD2 في عملية التنشيط البديل للخلايا اللمفاوية التائية. يُستخدم الكشف عن CD2 باستخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة في الممارسة السريرية لتحديد النمط الظاهري لسرطان الدم الحاد في الخلايا التائية، والأورام اللمفاوية، والالتهابات المزمنة، وحالات نقص المناعة.
• CD3 هو مُركّب بروتيني مُرتبط بمستقبل الخلايا التائية الخاص بالمستضد، وهو العلامة الوظيفية الرئيسية للخلايا اللمفاوية التائية. يُسهّل نقل إشارة التنشيط من الغشاء إلى سيتوبلازم الخلية. يُستخدم تحديد CD3 لتشخيص سرطان الدم الحاد في الخلايا التائية، والأورام اللمفاوية (لا يُعبّر عن CD3 في الأورام اللمفاوية غير التائية)، وأمراض نقص المناعة.
• CD4 هو بروتين سكري غشائي يُعبَّر عنه بواسطة مجموعة فرعية من الخلايا التائية المساعدة (المحفزات)، والتي تُشكِّل 45% من الخلايا الليمفاوية في الدم المحيطي. في المراحل المبكرة من نمو الخلايا الليمفاوية في الغدة الزعترية، تُعبَّر جميع الخلايا الليمفاوية القشرية عن مستضدات CD4، بالإضافة إلى CD8. تُعبِّر الخلايا التيموسية النخاعية، التي يُشبه نمطها الظاهري الخلايا التائية الناضجة CD4+ في الدم المحيطي (الخلايا التائية المساعدة)، عن مستقبلات CD4 أو CD8. في الدم المحيطي، تحمل ما يصل إلى 5% من الخلايا علامات CD4 وCD8. من الممكن التعبير الطفيف عن CD4 في بعض خلايا السلسلة الوحيدة. يُعبَّر عن CD4 في معظم حالات الأورام الليمفاوية التائية، بما في ذلك الفطار الفطراني، وكذلك في ابيضاض الدم التائي المرتبط بفيروس HTLV (فيروس HTLV - الفيروس التائي الليمفاوي البشري).
• CD5 هو جليكوبروتين أحادي السلسلة موجود في جميع الخلايا التائية الناضجة ومعظم الخلايا التيموسية، ويتم التعبير عنه بشكل ضعيف بواسطة الخلايا الليمفاوية البائية. يُكتشف CD5 في الخلايا السرطانية في سرطان الدم الليمفاوي المزمن للخلايا البائية واللمفوما المركزية. في أنواع أخرى من أمراض الغدد الليمفاوية الخبيثة - اللمفوما الجريبية، وسرطان الدم ذو الخلايا المشعرة، واللمفوما كبيرة الخلايا - لا يتم التعبير عنه.
• CD7 هو بروتين أحادي السلسلة، وهو أول مؤشر على تمايز الخلايا التائية. تُعبَّر عنه الخلايا اللمفاوية التائية الأولية حتى قبل هجرتها إلى الغدة الزعترية. يُكتَشَف CD7 في معظم الخلايا القاتلة الطبيعية، بينما يُلاحَظ ضعف التعبير عنه في الخلايا الوحيدة. لا تحتوي الخلايا اللمفاوية البائية والخلايا المحببة على هذا المستضد. يُستخدم تحديد CD7 لتشخيص الأورام اللمفاوية، وسرطان الدم الليمفاوي التائي لدى الأطفال.
• CD8 هو بروتين يتكون من سلسلتين متعددتي الببتيد مرتبطتين بجسور ثنائي الكبريتيد. يُعبَّر عنه بواسطة مجموعة فرعية من الخلايا الليمفاوية التائية السامة والكابحة، والتي تُشكِّل ما بين 20% و35% من الخلايا الليمفاوية في الدم المحيطي. كما يُعبَّر عن هذا المستضد بواسطة الخلايا الليمفاوية القاتلة الطبيعية، والخلايا التيموسية القشرية، و30% من الخلايا التيموسية النخاعية، ومجموعة فرعية من خلايا نخاع العظم الأحمر. يُدرَس CD8 لتحديد محتوى الخلايا الليمفاوية الكابتة (انظر قسم "الخلايا الليمفاوية التائية الكابتة في الدم" أعلاه).

• CD10 هو إندوبيبتيديز مرتبط بغشاء الخلية. يُعبَّر عنه بواسطة الأشكال الفتية من الخلايا الليمفاوية البائية ومجموعة فرعية من الخلايا الليمفاوية القشرية. يُعبَّر عنه بواسطة جميع خلايا سرطان الدم الليمفاوي الحاد (ALL).
• يتم التعبير عن CD11c على غشاء الخلية بواسطة الخلايا البلعمية والوحيدات والحبيبات والخلايا القاتلة الطبيعية وخلايا سرطان الدم المشعرة.
• CD13 هو جليكوبروتين تُعبِّر عنه خلايا سلالة الخلايا الوحيدة النقوية (الخلايا السلفية، والعدلات، والأساسات، والحمضات، والوحيدات، وخلايا ابيضاض الدم النقوي). وهو غائب عن الخلايا الليمفاوية التائية والبائية، وكريات الدم الحمراء، والصفائح الدموية.
• CD14 هو جليكوبروتين غشائي سطحي. يُعبَّر عنه بشكل رئيسي بواسطة الخلايا الوحيدة والبلعميات. يُكتَشَف CD14 في أكثر من 95% من الخلايا الوحيدة في الدم المحيطي ونخاع العظم. يُلاحَظ تعبير قوي عن CD14 في ابيضاض الدم النقوي الحاد. لا يُعبَّر عن هذا المستضد في ابيضاض الدم الليمفاوي الحاد والمزمن.
• CD15 هو سكريات قليلة التعدد. يشارك في البلعمة والانجذاب الكيميائي. يوجد هذا المستضد على سطح الخلايا المحببة الناضجة وخلايا بيريزوفسكي-ستيرنبرغ. يُكتشف التعبير عن مستضد CD15 في مرض هودجكين. أما في الأورام اللمفاوية غير الهودجكينية، فلا يُكتشف CD15 في معظم الحالات.
• يُعبَّر عن CD16 على سطح الخلايا المحببة، والوحيدات، والبلعميات، والخلايا القاتلة الطبيعية. جميع الخلايا الليمفاوية التي تُعبِّر عن هذا المستضد لديها القدرة على إحداث سمية خلوية تعتمد على الأجسام المضادة. يُحدَّد CD16 أثناء تحديد نمط سرطان الدم النقوي المزمن، لتوصيف الخلايا القاتلة الطبيعية.
• CD19 هو جليكوبروتين موجود في جميع الخلايا الليمفاوية البائية الطرفية وجميع أسلاف الخلايا البائية. وهو غائب في الخلايا البلازمية. وهو أول علامة على وجود الخلايا البائية، ويلعب دورًا مهمًا في تنظيم نشاطها وتكاثرها. يُعبَّر عن CD19 في جميع الخلايا السرطانية في سرطان الدم الحاد ذي الأصل الخلوي البائي، كما أنه موجود في بعض أشكال سرطان الدم أحادي الأرومات الحاد.
• CD20 هو بروتين غير مُغلَق. في عملية تكوين الخلايا الليمفاوية البائية، يظهر مستضد CD20 بعد CD19 في مرحلة ما قبل تمايز الخلايا الليمفاوية البائية. وهو غائب عن الغشاء البلازمي للخلايا الليمفاوية. يُعبَّر عنه في سرطان الدم الليمفاوي الحاد (ALL)، وسرطان الدم الليمفاوي المزمن للخلايا البائية، وسرطان الدم ذو الخلايا المشعرة، وسرطان لمفومة بوركيت، ونادرًا جدًا في سرطان الدم أحادي الأرومات الحاد.
• CD21 هو جليكوبروتين موجود بكميات كبيرة على الخلايا الليمفاوية البائية في الأعضاء الليمفاوية، وبكميات صغيرة على الخلايا الليمفاوية البائية في الدم المحيطي. CD21 هو مستقبل لفيروس إبشتاين بار.
• CD22 هو بروتين يتكون من سلسلتين بولي ببتيديتين. يُعبَّر عنه على غشاء معظم الخلايا الليمفاوية البائية، بما في ذلك الخلايا السلفية (الخلايا الليمفاوية الأولية). لا يُعبَّر عن المستضد على الخلايا الليمفاوية البائية (الخلايا البلازمية) بعد تنشيطها. يُكتَشَف التعبير الأوضح لـ CD22 على خلايا سرطان الدم ذي الخلايا المشعرة، بينما يكون التعبير عنه ضعيفًا في سرطان الدم النخاعي، وسرطان الدم الليمفاوي الحاد غير التائي.
• CD23 هو جليكوبروتين يتم التعبير عنه بدرجة أعلى بكثير بواسطة الخلايا الليمفاوية البائية المنشطة في الدم المحيطي. يتوسط CD23 السمية الخلوية المعتمدة على IgE والبلعمة بواسطة الخلايا البلعمية والخلايا الحمضية.
• CD25 هو جليكوبروتين أحادي السلسلة، يُعرف بأنه مستقبل منخفض الألفة للإنترلوكين-2 (IL-2). يُعبَّر عن هذا المستقبل على الخلايا الليمفاوية التائية المُنشَّطة، وبكثافة أقل على الخلايا البائية المُنشَّطة. في الدم المحيطي للأفراد الأصحاء، يوجد هذا المستضد على أكثر من 5% من الخلايا الليمفاوية.
• CD29 هو مستقبل فيبرونيكتين. ينتشر على نطاق واسع في الأنسجة، وتُعبِّر عنه كريات الدم البيضاء. يُستخدم الكشف عن CD29 في خلايا الدم المحيطية لتحديد نوع فرعي من الخلايا التائية ذات النمط الظاهري CD4+CD29+، والتي تُسمى الخلايا المساعدة من النوع 2 (Th2). تشارك هذه الخلايا في الاستجابة المناعية الخلطية عن طريق إنتاج اللمفوكينات.
• CD33 هو جليكوبروتين غشائي. يوجد على سطح خلايا النخاع العظمي والوحيدات. ويوجد أيضًا على سطح الخلايا الوحيدة، وبدرجة أقل، على سطح الخلايا المحببة في الدم المحيطي. تُعبِّر حوالي 30% من خلايا نخاع العظم الأحمر عن CD33، بما في ذلك الخلايا الأرومية النقوية، والخلايا السليفة النقوية، والخلايا النقوية. لا يوجد هذا المستضد في أغشية الخلايا الجذعية متعددة القدرات. يُستخدم تحديد CD33 لتوصيف الخلايا في حالات ابيضاض الدم النقوي. لا تُعبِّر خلايا ابيضاض الدم اللمفاوي والكريات الحمر عن CD33.
• CD34 هو بروتين فوسفوغليكوبروتين تُعبّر عنه الخلايا السلفية المكونة للدم، بما في ذلك الخلايا الجذعية أحادية القدرة. يُلاحظ التعبير الأوضح عن Ag في الخلايا السلفية المبكرة؛ ومع نضج الخلايا، ينخفض التعبير عن الواسمات. يوجد CD34 أيضًا في الخلايا البطانية. يُستخدم تحديد CD34 لتوصيف الخلايا في حالات ابيضاض الدم النقوي الحاد والليمفاوي. أما في حالات ابيضاض الدم الليمفاوي المزمن والليمفوما، فلا يُكتشف التعبير عن مستضد CD34.

• يتم التعبير عن CD41a بواسطة الصفائح الدموية والخلايا النواءية. تُستخدم الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للكشف عن CD41a لتشخيص سرطان الدم النقوي متعدد النوى. في حالة وهن الصفيحات جلانزمان، يكون التعبير عن هذا المستضد غائبًا أو مثبطًا بشكل ملحوظ.
• CD42b هو جليكوبروتين غشائي يتكون من سلسلتين بولي ببتيديتين. يُكتشف هذا البروتين على سطح الصفائح الدموية والخلايا النواءية. في الممارسة السريرية، يُستخدم الكشف عن CD42b لتشخيص اعتلال الصفيحات الدموية (متلازمة برنارد-سولييه).
• ينتمي CD45RA إلى فئة البروتينات السكرية عبر الغشائية. وهو مستضد شائع للكريات البيضاء. يُعبَّر عنه على غشاء الخلايا الليمفاوية البائية، وبدرجة أقل على الخلايا الليمفاوية التائية، وعلى الخلايا التيموسية النخاعية الناضجة. لا تُعبَّر عنه الخلايا المحببة.
• CD45RO هو مُستضد كريات الدم البيضاء الشائع ذو التركيب الجزيئي المنخفض CD45RA. يُكتشف في الخلايا التائية (الخلايا الليمفاوية التائية الذاكرة)، وهي مجموعة فرعية من الخلايا الليمفاوية البائية، والوحيدات، والبلعميات. تتفاعل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة لـ CD45RO مع معظم الخلايا التيموسية، وهي مجموعة فرعية من الخلايا الليمفاوية التائية الساكنة CD4+ وCD8+، والخلايا التائية الناضجة النشطة. تحمل الخلايا ذات الأصل النقوي الوحيدي، والخلايا المحببة، والوحيدات هذا المستضد أيضًا. يُكتشف في الأورام الليمفاوية المركزية والأورام الليمفاوية المناعية.
• CD46 هو ثنائي غلوكوزيل O. ينتشر على نطاق واسع في الأنسجة، ويتم التعبير عنه بواسطة الخلايا الليمفاوية التائية والبائية، والوحيدات، والحبيبات، والخلايا القاتلة الطبيعية، والصفائح الدموية، والخلايا البطانية، والأرومات الليفية، ولكنه غائب عن سطح خلايا الدم الحمراء. يوفر CD46 حماية للأنسجة من المتمم.
• CD61 هو مستضد صفيحات دموية. يُعبَّر عنه في صفيحات الدم المحيطي ونخاع العظم الأحمر، وكذلك في الخلايا النواءية وخلايا الأرومة النواءية. يُستخدم تحديده كعلامة في حالات ابيضاض الدم النواوي الحاد. يكون التعبير عن المستضد غائبًا أو مثبطًا لدى مرضى وهن الصفيحات الجلانزماني.
• CD95، المعروف أيضًا باسم Fas أو APO-1، هو جليكوبروتين غشائي، ينتمي إلى عائلة مستقبلات عامل نخر الورم. يُعبَّر عنه بكميات كبيرة في الخلايا الليمفاوية التائية (CD4+ وCD8+) في الدم المحيطي، وبدرجة أقل في الخلايا الليمفاوية البائية والخلايا القاتلة الطبيعية. يُعبَّر عن هذا المستضد أيضًا في الخلايا المحببة، والوحيدات، وخلايا الأنسجة، والخلايا السرطانية. يُحفِّز ارتباط CD95 بربيطة Fas (CD95L) موت الخلايا المبرمج في الخلايا.
• CD95L، أو ربيطة Fas، هو بروتين غشائي ينتمي إلى عائلة مستقبلات عامل نخر الورم. يُعبَّر عن هذا المستضد بواسطة الخلايا الليمفاوية التائية السامة، والخلايا القاتلة الطبيعية، وفي كثير من الأحيان بواسطة الخلايا السرطانية؛ وهو المُحفِّز الرئيسي لموت الخلايا المبرمج.
• HLA-DR هو مُحدِّد أحادي الشكل لجزيئات الصنف الثاني من مُعقَّد التوافق النسيجي الرئيسي البشري (HLA). يُعبَّر عن هذا المُؤشِّر في خلايا لانغرهانس، والخلايا الشجيرية للأعضاء اللمفاوية، وأنواع مُعيَّنة من البلاعم، والخلايا اللمفاوية البائية، والخلايا التائية المُنشَّطة، والخلايا الظهارية الزعترية. تُستخدم دراسة هذا المُؤشِّر للتحديد الكمي للخلايا اللمفاوية التائية المُنشَّطة ذات النمط الظاهري CD3+ HLA-DR+.

باستخدام مجموعة مختلفة من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للعلامات، من الممكن إنشاء صورة نمطية للخلايا المميزة لشكل معين من سرطان الدم.

بالإضافة إلى استخدام أساليب التنميط المناعي الظاهري للتشخيص والتشخيص التفريقي لأورام الدم، فقد ثبتت أهمية استخدامها في عملية العلاج لتقييم حالة الهدأة والعدد المتبقي من خلايا اللوكيميا. فمعرفة "الصورة" الظاهرية لخلايا الأرومات خلال فترة التشخيص، تُمكّن هذه العلامات من الكشف عن خلايا نسيلة اللوكيميا خلال فترة الهدأة، ومن خلال زيادة عددها، يُمكن التنبؤ بحدوث الانتكاس قبل فترة طويلة (من شهر إلى أربعة أشهر) من ظهور علاماته السريرية والشكلية.

[ 1 ]، [ 2 ]، [ 3 ]، [ 4 ]