العامل المسبب لمرض التولاريميا

التولاريميا مرضٌ رئيسيٌّ يصيب الحيوانات (القوارض)، ويصيب البشر كمرضٍ مُعدٍ حادٍّ ذي صورة سريريةٍ متنوعةٍ وبطءٍ في الشفاء. اكتشف ج. ماكوي وس. تشابين العاملَ المسببَ للتولاريميا عام ١٩١٢ خلال وباءٍ بين السناجب الأرضية في منطقة بحيرة تولار (كاليفورنيا)، وقد درسه إي. فرانسيس بتفصيلٍ، وهو من سُمّي الجنس تكريمًا له.

هذه هي قضبان متعددة الأشكال صغيرة جدًا، بحجم 0.2-0.7 ميكرومتر، كروية أو بيضاوية، والتي غالبًا ما تعطي صبغة ثنائية القطب عند استخدام طرق صبغ خاصة؛ وهي غير متحركة، سالبة الجرام، ولا تشكل أبواغًا؛ سلبية الكاتالاز، وتشكل كبريتيد الهيدروجين، وهي هوائية صارمة، ودرجة الحرارة المثلى للنمو هي 37 درجة مئوية، ودرجة الحموضة 6.7-7.2. تحتوي السلالات الخبيثة على كبسولة، وتشكل حمضًا بدون غاز أثناء تخمير بعض الكربوهيدرات (الجلوكوز، المالتوز، المانوز، الفركتوز، الدكسترين)، وتختلف درجة التخمير بين السلالات، ومحتوى G + C في الحمض النووي هو 33-36 مول٪. لا تنمو F. tularensis على بيئات عادية. استخدم G. McCoy وSh. Chapin وسط صفار متخثر. تنمو عليها عصية التولاريميا على شكل مستعمرات صغيرة رقيقة تشبه قطرات الندى، ثم تكتسب المزرعة طابع طبقة رقيقة من جلد الخنزير ذات قوام مخاطي ضعيف التعبير. اقترح إي. فرانسيس أجارًا مغذيًا لنمو عصية التولاريميا، يحتوي على 0.05-0.1% سيستين، و1% جلوكوز، و5-10% دم. في مثل هذا الوسط، يكون النمو أكثر خصوبة وخشونة: المستعمرات مستديرة ذات سطح أملس، ولونها حليبي، ورطبة، وذات قوام مخاطي، محاطة بهالة خضراء مميزة. النمو بطيء، وتصل المستعمرات إلى أقصى حجم لها في اليوم الثالث إلى الخامس (1-4 مم). تتكاثر بكتيريا التولاريميا جيدًا في كيس صفار جنين الدجاج، مما يؤدي إلى وفاته في اليوم الثالث إلى الرابع.

الأحماض الأمينية التالية ضرورية لنمو فطريات التولارنسيس: الأرجينين، الليوسين، الأيزوليوسين، اللايسين، الميثيونين، البرولين، الثريونين، الهيستيدين، الفالين، السيستين. أما بالنسبة لبعض الأنواع الفرعية، فتحتاج إلى السيرين، التيروزين، وحمض الأسبارتيك. كما تحتاج هذه الأنواع لنموها أيضًا إلى حمض البانتوثينيك، والثيامين، وأيونات المغنيسيوم. مع مراعاة هذه الخصائص، يمكن استخدام أوساط اصطناعية لزراعة فطريات التولارنسيس.

ينتمي جنس فرانسيسيلا إلى طائفة جاما بروتيوباكتيريا، شعبة بروتيوباكتيريا. ويشمل هذا الجنس أيضًا فطريات فرانسيسيلا نوفيسيدا، التي لم تُثبت قدرتها على التسبب بأمراض لدى البشر.

العامل المسبب لمرض التولاريميا هو طفيلي داخل الخلايا. ترجع ضراوته إلى كبسولة تُثبط البلعمة؛ والنورامينيداز الذي يُعزز الالتصاق؛ والذيفان الداخلي؛ والخصائص المُسببة للحساسية لجدار الخلية، بالإضافة إلى قدرته على التكاثر في الخلايا البلعمية وتثبيط تأثيرها القاتل. لم تُكتشف آليات الضراوة بعد. بالإضافة إلى ذلك، عُثر على مستقبلات قادرة على التفاعل مع شظايا Fc من الغلوبولينات المناعية IgG في عصية التولاريميا. ونتيجةً لهذا الارتباط، يُعطّل نشاط أنظمة المُتممة والبلعميات.

تحتوي بكتيريا F. tularensis ذات الشكل S (الضارة) على مستضدين: O وVi (مستضد كبسوليّ). يرتبط المستضد O بمستضدات البروسيلا. يؤدي تفكك S->SR->R إلى فقدان الكبسولة، وضعف الضراوة، وضعف المناعة. تنقسم بكتيريا F. tularensis إلى ثلاثة أعراق جغرافية (سلالات فرعية):

• هولاركتيك (منخفض الضراوة بالنسبة للأرانب المنزلية، لا يخمر الجلسرين ولا يحتوي على إنزيم السيترولين يوريداز، الموجود في بلدان نصف الكرة الشمالي)؛
• آسيا الوسطى (منخفضة الضراوة بالنسبة للأرانب، تحتوي على سيترولين يوريداز وتخمر الجلسرين)؛
• Nearctic (أمريكي)، أكثر مسبباً للأمراض بالنسبة للأرانب، يخمر الجلسرين، ويحتوي على سيترولين يوريداز.

بالإضافة إلى ذلك، فإن سلالات الأنواع الفرعية الأمريكية وآسيا الوسطى تمتلك نشاط الفوسفاتيز، وهو أمر غائب في سلالات الأنواع الفرعية الهولاركتيكية.

[ 1 ]، [ 2 ]، [ 3 ]، [ 4 ]، [ 5 ]، [ 6 ]

مقاومة العامل المسبب لمرض التولاريميا

تتميز فطريات التولارينسيس بثباتها العالي في البيئة الخارجية، خاصةً إذا احتوت على مواد مسببة للمرض. ففي العلف والحبوب الملوثة ببراز القوارض المريضة، تعيش لمدة تصل إلى 4 أشهر؛ وفي الماء - حتى 3 أشهر؛ وفي الجليد - لأكثر من شهر. وهي حساسة لأشعة الشمس المباشرة (تموت في غضون 30 دقيقة)، ودرجات الحرارة العالية (عند 60 درجة مئوية، تموت في غضون 10 دقائق)، وتحت تأثير محلول لايزول 3%، وكحول 50%، والفورمالين، ومطهرات أخرى، تموت في غضون 5-10 دقائق.

علم الأوبئة لمرض التولاريميا

القوارض هي المستودع الرئيسي لمرض التولاريميا في الطبيعة، ومن بينها حالات وبائية حيوانية تُلاحظ في الظروف الطبيعية. يُصاب البشر بالعدوى من الحيوانات فقط؛ ولا ينتقل هذا المُمْرِض من شخص لآخر. وُجد هذا المُمْرِض في 82 نوعًا من القوارض والأرانب، وغالبًا ما يوجد لدى مُمثلي أربع فصائل: القوارض الشبيهة بالفئران (Muridae)، والأرانب البرية (Leporidae)، والسناجب (Sciuridae)، واليربوع (Dipodidae). في روسيا، تُعتبر القوارض الشبيهة بالفئران هي الناقلات الرئيسية للمرض: جرذان الماء، وفئران الحقل الشائعة، وفئران المنازل، وجرذان المسك.

يمكن تقسيم الحيوانات إلى أربع مجموعات حسب حساسيتها لمرض التولاريميا:

• المجموعة الأولى - الأكثر عُرضةً للإصابة (الفئران، جرذان الماء، فئران المنازل، الفئران البيضاء، خنازير غينيا، وغيرها). الجرعة المميتة الدنيا هي خلية ميكروبية واحدة؛
• المجموعة الثانية - أقل حساسية (الجرذان الرمادية، الجوفر، إلخ). الجرعة القاتلة الدنيا هي مليار خلية ميكروبية، ومع ذلك، فإن خلية ميكروبية واحدة تكفي لإصابة بعضها؛
• المجموعة الثالثة (الحيوانات المفترسة - القطط، الثعالب، النمس). مقاومة للجرعات المعدية العالية، يستمر المرض دون أعراض ظاهرة؛
• المجموعة الرابعة - محصنة ضد مرض التولاريميا (الحيوانات ذوات الدم البارد، الطيور).

بالنسبة للبشر، الحد الأدنى للجرعة المعدية هو خلية ميكروبية واحدة. يمكن أن يُصاب البشر بالعدوى بجميع الطرق الممكنة: الاتصال المباشر وغير المباشر بالقوارض المريضة، أو جثثها، أو الأشياء المصابة بالقوارض؛ عن طريق الطعام والماء الملوثين بالقوارض؛ والغبار المحمول جوًا؛ وانتقال العدوى. وقد ثبتت الإصابة ببكتيريا التولاريميا لدى 77 نوعًا من المفصليات الماصة للدم. ويكتسب القراد ذو الأرجل المثقبة أهمية خاصة، حيث يبقى العامل الممرض فيها طوال الحياة، بل وينتقل عبر المبيض إلى الأبناء. تساهم هذه الظروف في ترسيخ المرض في الطبيعة. لا يُصاب البشر بالقراد عن طريق اللدغات، بل نتيجة ملامسة العامل الممرض للجلد مع فضلاته.

في روسيا، هناك 7 أنواع رئيسية من المناظر الطبيعية للبؤر الطبيعية لمرض التولاريميا: المستنقع، حقل المرج، السهوب، الغابات، سفوح التلال، التندرا وتوجاي (الصحراء).

[ 7 ]، [ 8 ]، [ 9 ]، [ 10 ]

أعراض مرض التولاريميا

يخترق العامل المسبب لمرض التولاريميا الجسم من خلال الأغطية الخارجية (الجلد والأغشية المخاطية التالفة والسليمة). غالبًا ما تتكون القرح في موقع الاختراق. من خلال الأوعية اللمفاوية، تدخل البكتيريا إلى العقدة اللمفاوية الإقليمية وتتكاثر فيها بحرية؛ تؤدي العملية الالتهابية إلى تكوين الدبل. من هنا، يخترق العامل الممرض الدم، ويسبب تجرثم الدم تعميم العملية، وتشارك فيه أعضاء وأنسجة مختلفة، ويؤدي تكاثر البكتيريا إلى تكوين حبيبات وقرح نخرية. يرتبط إعادة الهيكلة التحسسية للجسم بتجرثم الدم والتعميم. تتراوح فترة حضانة التولاريميا من يومين إلى 8 أيام. يبدأ المرض بشكل حاد: تظهر الحمى والصداع وآلام العضلات واحتقان الوجه. يعتمد مسار المرض على موقع بوابة الدخول، حيث تُميّز الأشكال السريرية التالية من التولاريميا: التقرحي الغدي (الدبلي)، العيني الغدي، الذبحي الغدي، البطني، والرئوي. لا تتجاوز نسبة الوفيات بالتولاريميا 1-2%.

المناعة بعد العدوى قوية، ومستمرة، وفي معظم الحالات تستمر مدى الحياة، ولها طبيعة خلوية، وتنشأ أساسًا عن الخلايا الليمفاوية التائية والبلعميات، وبدرجة أقل عن الأجسام المضادة. البلعمة لدى الأفراد ذوي المناعة الكاملة.

التشخيص المختبري لمرض التولاريميا

تُستخدم جميع الطرق الميكروبيولوجية لتشخيص مرض التولاريميا. تُجرى الدراسة في مختبرات آمنة. تُحدد عينة الدراسة - الدم، وثقب الزوائد الأنفية، وكشط القرحة، وإفرازات الملتحمة، واللويحات البلعومية، والبلغم، وغيرها - بناءً على الشكل السريري للمرض. بالإضافة إلى ذلك، يُمكن أخذ الماء والمنتجات الغذائية للدراسة. في البؤر الطبيعية لمرض التولاريميا، تُجرى دراسات منهجية مُخطط لها لعزل العامل المسبب للمرض من القوارض.

نادرًا ما تُعطي الطريقة البكتريولوجية لتشخيص التولاريميا لدى البشر نتائج إيجابية. عادةً ما تُعزل مزرعة نقية بعد تجميعها في حيوانات مختبرية حساسة. تُستخدم الفئران البيضاء وخنازير غينيا في الاختبارات الحيوية. تُحقن الفئران تحت الجلد، وخنازير غينيا داخل الصفاق؛ وتموت الحيوانات في اليوم الثالث إلى السادس، وأحيانًا بعد الصقيع. تُحفظ الحيوانات المصابة في ظروف خاصة (كما هو الحال في تشخيص الطاعون) وتُراقب لمدة تتراوح بين 6 و14 يومًا. لا تموت حيوانات التجارب الهلامية لمدة تتراوح بين 7 و15 يومًا، بل تُذبح في اليوم الخامس عشر والعشرين، وتُشرح الجثث. في حالة الإصابة بالتولاريميا، تُكتشف تغيرات مرضية وتشريحية على شكل عملية إنتاجية مصحوبة بنخر. تُعزل مزرعة نقية من الأعضاء الداخلية باستخدام وسط صفار، أو تركيز جلوكوز-سيستين في الدم، إلخ. يعتمد تحديد الهوية على مورفولوجيا العامل الممرض وخصائصه الصبغية، وغياب النمو على غشاء الصفار، والتراص مع مصل متماثل. يُعزى ذلك إلى قدرة العامل الممرض على الإمراض لدى الفئران البيضاء وخنازير غينيا. يمكن عزل المزرعة النقية عن طريق إصابة أجنة دجاج عمرها 12 يومًا وكيس الصفار. لعزل مزرعة نقية من العامل الممرض من الماء، تُطرد أو تُرشح عبر مرشحات بكتيرية، وتُستخدم الرواسب لإصابة حيوانات المختبر. عند دراسة المنتجات الغذائية، تُغسل بمحلول MP B، وتُطرد مركزيًا، وتُستخدم الرواسب لإصابة حيوانات المختبر.

بالتزامن مع الفحص البكتريولوجي، تُحضّر لطاخات من المادة قيد الدراسة وتُلوّن وفقًا لطريقة رومانوفسكي-جيمسا. في لطاخات الأعضاء، يُمكن الكشف عن بكتيريا صغيرة كروية الشكل وعصوية الشكل، تتواجد داخل الخلايا على شكل مجموعات، مُشكّلةً كبسولةً دقيقة.

من أجل التشخيص، يتم استخدام تفاعل التكتل المفصل، وRPGA، وRIF.

تُستخدم اختبارات الحساسية للتشخيص المبكر لمرض التولاريميا (ابتداءً من اليوم الخامس من ظهور المرض). يُستخدم نوعان من التولارين، وبالتالي، تُعتمد طريقتان لإعطائهما: الجلدي وداخل الأدمة. نظرًا لاختلاف تركيز المادة المسببة للحساسية في كلا النوعين من التولارين، يُحظر استخدام التولارين الجلدي لإجراء اختبار داخل الأدمة، والعكس صحيح. تُؤخذ نتائج رد الفعل التحسسي في الاعتبار بشكل ديناميكي بعد 24، 36، و48 ساعة. يُعتبر أي تسلل لا يقل قطره عن 5 مم نتيجة إيجابية. في الأشخاص المُلقحين أو المصابين بالتولاريميا، تبقى نتائج اختبارات الحساسية إيجابية لعدة سنوات (رد فعل تحسسي).

الوقاية المحددة من مرض التولاريميا

للوقاية المحددة، يُستخدم لقاح ضد داء التولاريميا ، الذي حصل عليه عام ١٩٣٠ الطبيبان العسكريان الروسيان ب. يا. إلبرت ون. أ. غايسكي من سلالة Me 15. يوفر هذا اللقاح مناعة قوية لمدة ٥-٦ سنوات عند الإصابة بالسلالات الفرعية الأوروبية والهولاركتيكية، وهو فعال ضد السلالة الأمريكية من هذا المُمْرِض. يُجرى التطعيم وفقًا للمؤشرات الوبائية، وكذلك للأشخاص المعرضين للخطر. يُسمح بالتطعيم المتزامن ضد التولاريميا وداء البروسيلات، والتولاريميا والطاعون، وكذلك ضد التولاريميا وبعض الأمراض المعدية الأخرى.

إن الوقاية غير المحددة من مرض التولاريميا هي نفسها المتبعة في الوقاية من الأمراض الحيوانية المنشأ الأخرى، وتهدف في المقام الأول إلى السيطرة على القوارض.