بروتين بنس-جونز

لا يحتوي بول الشخص السليم على بروتين بنس جونز، والذي يتمثل في سلاسل خفيفة من الغلوبولينات المناعية التي يتم اكتشافها نتيجة تكوين عمليات الورم الخبيثة.

إن الاختبارات المعملية لوجود بروتينات محددة منخفضة الوزن الجزيئي ضرورية لتشخيص عدد من الحالات المرضية (غالبًا مشاكل في الجهاز المناعي β)، وكذلك لتحديد فعالية العلاج المستخدم.

عند زيادة إنتاجه، يُنتج بروتين بنس جونز بواسطة خلايا البلازما، وينتقل مع مجرى الدم، ويُطرح مع البول. وهذه الخاصية الأخيرة للأجسام البروتينية هي التي تسمح بتشخيص الأمراض التالية عند فحص البول:

• المايلوما ؛
• ساركوما العظام ؛
• ورم البلازماويات؛
• سرطان الدم الليمفاوي المزمن ؛
• داء الحبيبات اللمفاوية ؛
• داء النشواني الأولي ؛
• غلوبولين الدم الكبير ؛
• اعتلال غامائي أحادي النسيلة مجهول السبب.

تم تأكيد العلاقة بين إطلاق بروتين معين والخلل الكلوي اللاحق الناجم عن التأثير السام للأجسام البروتينية على الهياكل الظهارية للأنابيب الكلوية، والذي بدوره يسبب ظاهرة ضمور الكلى، ومتلازمة فانكوني، والداء النشواني الكلوي، سريريًا.

[ 1 ]، [ 2 ]، [ 3 ]، [ 4 ]، [ 5 ]، [ 6 ]، [ 7 ]، [ 8 ]، [ 9 ]

بروتين بنس جونز في البول

يُطلق على وجود البروتين في البول اسم البيلة البروتينية. تُعرف البيلة البروتينية قبل الكلوية بوجود كمية كبيرة من البروتين منخفض الوزن الجزيئي في البول. في هذه الحالة، لا يوجد أي ضرر في المرشح الكلوي والأنابيب الكلوية، وتكون وظائف الكلى الطبيعية غير قادرة على ضمان إعادة امتصاص أجسام البروتين. أما البيلة البروتينية خارج الكلوية (الكاذبة)، أي التي تحدث دون اختلال في وظائف الكلى، فتشير إلى وجود عملية معدية أو خبيثة في الجسم. تُلاحظ البيلة البروتينية في 60-90% من حالات مرضى المايلوما. وتُمثل ورم بنس-جونز النقوي حوالي 20% من الحالات المرضية.

يتم تمييز بروتين بنس جونز في البول نتيجةً للتغيرات الخلطية في الجهاز المناعي بيتا. يرتبط ظهور أجسام البروتين بأمراض المايلوما، وداء الأرومة الدموية البارابروتينية، والتهاب بطانة الأوعية الدموية، وداء والدنستروم الكبروغلوبوليني، وسرطان الدم الليمفاوي، والساركوما العظمية. يُعد الكشف عن بروتين بنس جونز في البول خطوةً تشخيصيةً وتنبؤيةً مهمة. نظرًا لوزنه الجزيئي المنخفض، يُفرز بروتين بنس جونز في البول، مما يُلحق الضرر بظهارة الأنابيب الكلوية، مما يُعرّضها لخطر الإصابة بالفشل الكلوي، والذي قد يؤدي إلى الوفاة. كما يُعدّ التصنيف الدقيق للبروتين حسب نوعه أمرًا بالغ الأهمية: فبروتين λ له تأثيرٌ سامٌّ للكلى أكبر من بروتين κ.

[ 10 ]، [ 11 ]، [ 12 ]، [ 13 ]، [ 14 ]

اختبار بروتين بنس جونز

يشير وجود أجسام بروتينية غير المصل في البول إلى الإصابة بسرطان الدم الليمفاوي، أو ساركوما العظام، أو الورم النقوي (أورام في نخاع العظم). عند تسخين راشح البول إلى درجة حرارة تتراوح بين 45 و60 درجة مئوية، يترسب بروتين بنس-جونز على شكل رواسب عكرة تستقر على جدران أنبوب الاختبار. يؤدي رفع درجة الحرارة إلى درجة الغليان إلى إذابة العكارة المنفصلة.

يتم إجراء التحليل الكمي لبروتين بنس جونز على النحو التالي:

• استخدام جزء من الماء وجزء من حمض النيتريك ككاشف؛
• وضع حمض النيتريك (0.5-1 مل) في أنبوب اختبار مع طبقات من نفس مستوى البول المراد اختباره؛
• تقييم النتيجة بعد دقيقتين (ظهور حلقة رقيقة على حدود الوسط السائل يشير إلى وجود أجسام بروتينية بنسبة 0.033%).

يتطلب رصد حلقة خيطية تخفيف البول بالماء بنسبة ١:١. يدل ظهور حلقة سميكة على ضرورة خلط جزء من البول بثلاثة أجزاء من الماء، وفي حالة الحلقة المتماسكة، يُخفف جزء من البول بسبعة أجزاء من الماء. ويستمر التخفيف حتى ظهور الرواسب المميزة خلال الدقيقة ٢-٣ من الاختبار.

تُحسب كمية البروتين المُضافة بضرب 0.033% في قيمة التخفيف. على سبيل المثال، خُفِّف البول عشر مرات، وظهرت حلقة من أجسام البروتين في نهاية الدقيقة الثالثة من الدراسة، ثم تُحسب نسبة البروتين المُضافة كما يلي: 0.033 × 10 = 0.33.

إذا لم يكن هناك رواسب، يتم تقييم درجة العكارة - آثار واضحة أو ضعيفة أو بالكاد يمكن تمييزها من العكارة.

[ 15 ]، [ 16 ]، [ 17 ]، [ 18 ]، [ 19 ]

إفراز بروتين بنس جونز

اعتمادًا على نوع الغلوبولين المناعي المفرز، يتم التمييز بين:

• أمراض السلسلة الخفيفة (إفراز بروتين بنس جونز)؛
• اعتلال كبيبات الكلى (إفراز الغلوبولينات المناعية الأخرى).

من الممكن أيضًا حدوث توليفات مختلفة من تلف الكلى. وكما تُظهر الممارسة، يُعد اعتلال الكلية نتيجةً لأمراض تكاثرية لمفية (مثل الورم النقوي المتعدد، وسرطان الدم الليمفاوي المزمن، ومرض والدنستروم، وغيرها).

عند إطلاقها في مجرى الدم، وكما هو الحال مع جميع البروتينات التي يصل وزنها الجزيئي إلى 40 كيلو دالتون، تتجاوز السلاسل الخفيفة المرشح الكلوي، ثم تتحلل إلى قليلات الببتيدات والأحماض الأمينية عبر الليزوزومات. يؤدي فرط السلاسل الخفيفة إلى خلل في تفاعل الهدم، وربما إطلاق إنزيمات الليزوزومات، مما يؤدي إلى نخر الأنسجة الأنبوبية. تؤدي الأجسام البروتينية إلى عدم القدرة على إعادة الامتصاص، وعندما تتحد السلاسل الخفيفة وحيدة النسيلة مع بروتين تام-هورسفال، تتشكل أسطوانات بروتينية في الأنابيب البعيدة.

بروتين بنس جونز في مرض الورم النقوي المتعدد

الورم النقوي المتعدد هو حالة مرضية يُنتج فيها الجسم سلاسل من الغلوبولين المناعي خفيفة الوزن بدلاً من سلاسل كاملة. يُشخَّص المرض ويُراقَب من خلال فحوصات البول المخبرية، والتي تُظهر المحتوى الكمي للأجسام البروتينية. يعتمد تحديد النوع الفرعي للورم النقوي على تحليل مصل الدم. تشمل العلامات السريرية للمرض: متلازمة ألم العظام، واضطراب التبول، وأورام دموية مجهولة المصدر، واحتباس السوائل في الجسم.

يُكتشف بروتين بنس جونز في المايلوما بناءً على فحوصات قياسية تُظهر المحتوى الكمي للأجسام البروتينية وتُقيّم درجة تلف الكلى. يُفسر تحديد البروتين في البول تلف الظهارة المصاحب لتصلب سدى الكلى، والذي يُسبب مع مرور الوقت الفشل الكلوي، وهو سبب شائع للوفاة نتيجة تلف المايلوما (حيث يُسد بروتين بنس جونز الأنابيب الكلوية تمامًا، مما يمنع التبول).

تشير البيانات الإحصائية إلى أن المايلوما تختلف عند الرجال الذين تزيد أعمارهم عن 60 عامًا، والذين لديهم تاريخ من الاستعداد الوراثي، ويعانون من السمنة وضعف المناعة، وأيضًا تعرضوا لمواد سامة ومشعة.

[ 20 ]، [ 21 ]، [ 22 ]، [ 23 ]، [ 24 ]

تحديد بروتين بنس جونز

لتمييز بروتين معين، تُجرى دراسة مخبرية لمتوسط كمية بول الصباح (يتطلب حجمًا لا يقل عن 50 مل). يمكن تحديد وجود بروتين بنس-جونز، مع تحديد المكون الكمي، بطريقة التثبيت المناعي. يتم فصل البروتينات بالرحلان الكهربائي، يليه تثبيت مناعي باستخدام أمصال خاصة. عند ارتباط البروتين بأجسام مضادة من سلاسل خفيفة وثقيلة من الغلوبولينات المناعية، تتشكل معقدات مناعية، تُقيّم بالتلوين.

تجدر الإشارة إلى أنه حتى أدنى تركيز للبروتين يُكتشف من خلال تفاعل الترسيب مع حمض السلفوساليسيليك. يُحدد بروتين بنس جونز بخلط البول المُرشَّح (4 مل) مع محلول أسيتات (1 مل). يُنتج التسخين اللاحق إلى 60 درجة مئوية في حمام مائي، مع الاحتفاظ بعينة إيجابية لمدة 15 دقيقة، رواسب مميزة. تُعتبر هذه الطريقة الأكثر موثوقية. قد تؤثر البيئة الحمضية أو القلوية المفرطة وانخفاض الكثافة النسبية للبول سلبًا على نتائج التحليل.

إن طرق البحث التي تُذاب فيها بروتين بنس جونز بالتسخين إلى ١٠٠ درجة مئوية أو تُرسب مرة أخرى بعد التبريد غير موثوقة، إذ لا تمتلك جميع عناصر البروتين الخصائص المقابلة. كما أن استخدام ورق المؤشر غير مناسب تمامًا للكشف عن بروتين بنس جونز.

[ 25 ]، [ 26 ]، [ 27 ]، [ 28 ]، [ 29 ]، [ 30 ]