التنميط النووي

تُستخدم مزارع الدم قصيرة المدى، وخلايا نخاع العظم، والأرومات الليفية غالبًا لدراسة الكروموسومات. يُطرد الدم المُضاف إليه مضاد للتخثر، والمُرسل إلى المختبر، مركزيًا لترسيب كريات الدم الحمراء، وتُحضن كريات الدم البيضاء في وسط زراعة لمدة يومين إلى ثلاثة أيام. يُضاف فيتوهيماجلوتينين إلى عينة الدم، إذ يُسرّع تراص كريات الدم الحمراء ويُحفّز انقسام الخلايا الليمفاوية. تُعدّ المرحلة الأنسب لدراسة الكروموسومات هي الطور الاستوائي للانقسام المتساوي، لذلك يُستخدم الكولشيسين لإيقاف انقسام الخلايا الليمفاوية في هذه المرحلة. تؤدي إضافة هذا الدواء إلى المزرعة إلى زيادة نسبة الخلايا في الطور الاستوائي، أي في مرحلة دورة الخلية التي تكون فيها الكروموسومات أكثر وضوحًا. يتضاعف كل كروموسوم (يُنتج نسخة خاصة به)، وبعد التلوين المناسب، يظهر كروماتيدين متصلين بالسنترومير، أو الانقباض المركزي. تُعالَج الخلايا بعد ذلك بمحلول كلوريد الصوديوم منخفض التوتر، وتُثبَّت وتُلوَّن.

لتلوين الكروموسومات، تُستخدم عادةً صبغة رومانوفسكي-جيمسا، أو أسيتكارمين 2%، أو أسيتارسين 2%. تُلوّن هذه الصبغات الكروموسومات بشكل كامل ومتساوٍ (طريقة روتينية)، ويمكن استخدامها للكشف عن التشوهات العددية في الكروموسومات البشرية.

للحصول على صورة مفصلة لبنية الكروموسوم، وتحديد كل كروموسوم على حدة أو أجزائه، تُستخدم طرق مختلفة للصبغ التفاضلي. أكثر الطرق شيوعًا هي صبغة جيمسا، بالإضافة إلى صبغات G وQ. عند فحص مجهر التحضير على طول الكروموسوم، يُكشف عن عدد من الأشرطة المصبوغة (الهيتروكروماتين) وغير المصبوغة (اليوكروماتين). تسمح طبيعة الخطوط المستعرضة الناتجة بهذه الطريقة بتحديد كل كروموسوم في المجموعة، حيث أن تناوب الأشرطة وأحجامها فردي وثابت تمامًا لكل زوج.

تُصوَّر صفائح الطور الاستوائي للخلايا الفردية. تُقص الكروموسومات الفردية من الصور وتُلصق بالترتيب على ورقة؛ تُسمى هذه الصورة للكروموسومات "النمط النووي".

يؤدي استخدام الصبغة الإضافية، بالإضافة إلى الطرق الجديدة للحصول على المستحضرات الكروموسومية التي تسمح بتمديد الكروموسومات في الطول، إلى زيادة دقة التشخيص الخلوي الوراثي بشكل كبير.

وُضعت تسمية خاصة لوصف النمط النووي البشري. يُشار إلى النمط النووي الطبيعي للرجل والمرأة على التوالي بـ 46، XY و46، XX. في متلازمة داون، التي تتميز بوجود كروموسوم إضافي رقم 21 (التثلث الصبغي رقم 21)، يُوصف النمط النووي للمرأة بأنه 47، XX 21+، وللرجل بأنه 47، XY، 21+. في حال وجود خلل هيكلي في الكروموسوم، من الضروري الإشارة إلى الذراع الطويل أو القصير المتغير: الحرف p يُشير إلى الذراع القصير، والحرف q يُشير إلى الذراع الطويل، والحرف t يُشير إلى الانتقال. وهكذا، في حالة حذف الذراع القصير للكروموسوم رقم 5 (متلازمة صرخة القط)، يُوصف النمط النووي الأنثوي بأنه 46، XX، 5p-. والدة طفل مصاب بمتلازمة داون الانتقالية، وهي حاملة للكروموسوم الانتقالي المتوازن 14/21، لديها النمط النووي 45، XX، t(14q؛ 21q). يتشكل الكروموسوم الانتقالي من اندماج الذراعين الطويلين للكروموسومين 14 و21، مع فقدان الذراعين القصيرين.

ينقسم كل ذراع إلى مناطق، تنقسم بدورها إلى مقاطع، يُشار إليها بالأرقام العربية. يُعدّ مركز الكروموسوم نقطة البداية لحساب المناطق والمقاطع.

وبالتالي، تُستخدم أربعة تسميات لتضاريس الكروموسومات: رقم الكروموسوم، ورمز الذراع، ورقم المنطقة، ورقم القطعة داخل المنطقة. على سبيل المثال، يشير الرقم 6p21.3 إلى الكروموسوم 6 من الزوج السادس، وذراعه القصير، والمنطقة 21، والقطعة 3. هناك أيضًا رموز إضافية، وتحديدًا pter - نهاية الذراع القصير، وqter - نهاية الذراع الطويل.

تسمح الطريقة الخلوية الوراثية للبحث باكتشاف الحذف والتغيرات الأخرى في الكروموسومات فقط بحجم مليون قاعدة (نيوكليوتيدات).

[ 1 ]، [ 2 ]، [ 3 ]، [ 4 ]